“定于一尊”指思想、学术、道德等以一个有最高权威的人做唯一的标准。
此典出自《史记·秦始皇本纪》：“今皇帝并有天下，别黑白而定一尊。”
公元前221年，秦王嬴政统一全国，称为始皇帝。秦始皇统一全国以后，废除了分封制，实行郡县制，把全国分为三十六郡，郡下又设了县。他还统一了法律、度量衡、货币和文字，修建驰道，实现车同轨、书同文。这些举措，对巩固秦王朝中央集权，起了积极的推动作用，在历史上是一大进步，但也遭到了一些守旧的读书人的反对。
公元前213年，秦王朝又增加了四个郡。为了祝贺，在咸阳宫里开了个庆祝会。大臣们都争相向秦始皇敬酒，表示祝贺。大臣称赞秦统一后，所采取的一系列改革措施是自古以来所有君王都没干过的伟大事业。这时，有位叫淳于越的儒生对秦始皇说：周王实行分封制，周朝享受了八百多年的天下。如今皇帝统一天下，但是自己的子弟和功臣连一块土地都没有，这是不行的。不论干什么，不把古人当老师最终都会失败的。秦始皇见发生了争吵，就征求其他大臣的意见。丞相李斯说：五帝的事业各不相同，三代的制度也不一样，不能照搬照抄。以前列国散乱，诸侯混战，一些读书人假造圣贤，托古说教，以古否今。如今天下统一，制度统一，举国上下定于一尊，只要注意法令，劝导农民只要专心干活就行了。如果拿古书来对照新法，造谣生事，毁谤朝廷，国家还成何体统。为此，李斯建议，除了秦国的历史和那些有用的书如医药、占卜、种树、法令等外，其余的诗、书、百家言论，都要全部烧毁。
秦始皇听从了李斯的建议，因此发生了历史上著名的焚书坑儒事件。